在体内富集组蛋白或转录因子(TF)结合的DNA,随后进行qPCR和/或下一代测序,为研究全基因组蛋白质-DNA相互作用提供了一个有利的工具。通常用于实现这一目标的主要方法是免疫沉淀后测序(ChIP-seq)。这种方法包括高度特异的ChIP-exo和ChIP-nexus。这两种实验提供高分辨率的映射。然而,这些实验的主要局限性在于它们需要大量的输入材料、细胞或组织,以产生足够强的信号,超过背景噪音。CUT&RUN(靶向裂解和核酸酶释放)是为了使用有限的生物材料对蛋白质-DNA相互作用进行映射而开发的,它需要更少的样品量,同时显著提高了映射分辨率。然而,这种实验的一个相当大的缺点是抗体未耦合pAG-MNase的非特异性裂解,显著限制了CUT&RUN在不同物种和细胞/组织类型中大多数转录因子的特异性使用。此外,原始CUT&RUN步骤繁琐,需要优化实验条件,仍然耗时。
整合ChIP和CUT&RUN的所有优势,克服其缺点,EpiNext? CUT&LUNCH(靶向裂解并均匀解放独特核酸复合物)检测试剂盒可以在创纪录的时间内实现对目标蛋白质/DNA复合物的高度特异富集。
为什么要花费数天时间进行传统的CUT&RUN或ChIP实验,当你可以在不牺牲性能的情况下更快地实现蛋白质/DNA富集呢?使用EpigenTek的新CUT&LUNCH套件,你可以在仅一个早晨的实验中迅速富集目标蛋白质/DNA复合物。
快速方案:在不到2小时内完成实验。
低非特异性背景:仅有3-5%的非特异性DNA结合。
高特异性和分辨率:DNA在富集目标蛋白质区域的两端被选择性地切割。
具有成本效益:与传统的CUT&RUN实验相比,每次反应的价格几乎是一半。
无需特殊软件:使用现有经过时间考验的ChIP-seq生物信息学流程来进行NGS数据分析。
不要让冗长的实验步骤耽误你的一天。选择CUT&LUNCH,获得高效、高质量的结果,符合你的时间表和预算。富集你的蛋白质/DNA复合物,重新拥有你的午餐时间!
产品名称 | 货号 | 规格 |
EpiNext CUT&LUNCH 检测试剂盒 EpiNext CUT&LUNCH Assay Kit | P-2035-24 | 24 Reactions |
EpiNext CUT&LUNCH 检测试剂盒包含了富集特定蛋白质(组蛋白或强结合转录因子)特异性DNA复合物所需的所有必要试剂,以通过qPCR或NGS从各种细胞样品中分析蛋白质和DNA之间的相互作用。在这个实验中,细胞被渗透化并暴露在感兴趣的ChIP级抗体中。通过使用独特的核酸裂解酶混合物,靶向染色质区域两端的DNA序列被切除。被释放的非特异性蛋白质-DNA复合物被消除,只有结合抗体的复合物将被选择性地回收。被捕获的蛋白质/DNA复合物中的DNA片段被纯化,并可以直接用于基因特异性qPCR或DNA文库构建,以分析蛋白质和DNA之间的相互作用。
CUT&LUNCH | 传统 CUT&RUN | 芯片 | |
工作流程方便程度 | 方便 总共只需 19 个步骤 | 不太方便 >总共 50 步 | 因不同的 ChIP 检测而异 |
所需细胞数量 | 2,000 - 500,000 | 5,000 - 500,000 | 100 - 10,000,000 |
分析目标范围 | 适用于组蛋白 适用于TF蛋白 | 适用于组蛋白 不适用于TF蛋白 | 适用于组蛋白 适用于TF蛋白 |
裂解和收集的 DNA 的特异性 |
|
| 不适用 |
序列分辨率 | 高 | 高 | 中等 |
负/阳性对照率 (%) | 5% | 30% | 20% |
检测时间长度 | 1 小时 50 分钟 | 6 小时 - 2 天 | 对于不同的 ChIP 检测,从 4 小时 - 2 天不等 |
每次检测反应的价格 | 低 | 高 | 不同 |
微信扫码在线客服