Biogradetech：Human T-Activator CD3/CD28 Beads

CAR-T和TCR-T是目前肿瘤免疫治疗技术的热点，不管是CAR-T技术还是TCR-T技术，T细胞的体外培养都可以使用CD3单抗和CD28单抗，刺激T细胞使其激活和扩增。  

Biogradetech的Human T-Activator CD3/CD28 Beads（货号：C-BETA2001）是专为人类T细胞的分离和体外扩增而设计的，无需饲养层细胞即可活化T细胞。这些磁珠广泛应用于各种T细胞培养技术，包括CAR-T细胞疗法。借助与磁珠结合的抗人CD3和抗人CD28抗体，Human T-Activator CD3/CD28 Beads为分离和扩增人类T细胞提供了一种简单而有效的方法。  

产品信息

• 货号：C-BETA2001

• 反应性：人类

• 浓度：2 × 108 beads/mL

• 粒径：5 μm

• 内毒素：1 EU/mL

• 用途：体外T细胞激活和扩增，适用于富集的T细胞或外周血单个核细胞（PBMCs）

• 配方：含有人血清白蛋白（HSA）的磷酸盐缓冲盐水（PBS），pH 7.4

• 稳定性：2年

所需材料

1. 人类T细胞培养基。

2. 用于最佳扩增的人类细胞因子，如IL-2、IL-7、IL-15等。

操作步骤

1. 洗涤Human T-Activator CD3/CD28 Beads

• 将珠子悬浮于管中，轻轻振荡或倾斜旋转以确保充分混合。

• 将所需体积的珠子转移到新的管中。

• 加入等体积的含有1% HSA的PBS进行悬浮。

• 将管放置在磁架上1分钟，废弃上清液。

• 从磁架上取下管子，用相同体积的含有1% HSA的PBS重新悬浮珠子。

2. 分离CD3+ T细胞

• 轻轻悬浮Ficoll分离的PBMCs于含有1% HSA的PBS中，并调整细胞密度。

• 将洗涤过的珠子以适当的比例加入PBMCs中。

• 旋转样品并在室温孵育。

• 使用T细胞培养基或含有1% HSA的PBS稀释珠子和细胞的混合物，并将管子放置在磁架上。

• 去除上清液，并在含有IL-2的T细胞培养基中悬浮混合物。

3. T细胞激活和扩增

• 每天从第3天开始计数T细胞的数量。

• 在细胞扩增的后期，通过轻轻吹气细胞悬浮液来解离珠子和细胞。

• 当CD3+ T细胞超过1 × 106 cells/mL时，使用含有IL-2的T细胞培养基稀释细胞。

• 在培养结束时（第9-14天），计数细胞并使用磁架去除珠子。

产品数据展示

图1 通过磁珠分离CD3+ T细胞。将PBMCs与Human T-Activator CD3/CD28 Beads（货号：C-BETA2001）以3个珠子与每个细胞的比例孵育30分钟，并通过流式细胞术分析阳性（分离）细胞的分离效率。  

图2 纯化的人类CD3+T细胞扩增。使用Human T-Activator CD3/CD28 Beads（货号：C-BETA2001）刺激纯化的人类CD3+ T细胞。细胞在含有300 IU/mL IL-2的T细胞培养基中扩增。激活后的细胞在高细胞存活率下扩增了13天。   

Biogradetech是全球生命科学和医药研发行业关键原料与试剂的领先供应商。他们提供广泛的产品组合，包括细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域的试剂。Biogradetech的产品受到全球生物研究机构和生物制药公司的高度追捧，他们以高质量、可靠性和服务而闻名。