Genvivo：HaloTag蛋白标签荧光配体

HaloTag的背景及应用：

在生命科学研究中，蛋白质标记是一项关键的技术，它能够帮助科学家们研究蛋白质的功能、相互作用以及定位等重要信息。然而，传统的蛋白质标记技术往往存在一些限制，如标记物的大小、稳定性和标记效率等方面的问题。幸运的是，随着科学技术的发展，一种革命性的蛋白质标记技术——HaloTag的出现，为研究人员提供了全新的解决方案。

HaloTag是由Promega公司开发的一种基于蛋白结构域的标记技术，它结合了蛋白结构域的高亲和性和化学标记物的灵活性，使其成为一种出色的蛋白质标记工具。

HaloTag标记蛋白质的原理是基于融合蛋白标签和合成荧光配基之间共价键的形成，可用于标记细胞或其他生化环境中的目的蛋白以表征和分析其定位及功能。HaloTag报告基因蛋白是33kDa的单体蛋白，是一种经基因工程改造、无催化活性的水解酶衍生物，在生理条件下可以快速和 HaloTag荧光配体形成不可逆的共价键从而实现对目的蛋白的高特异性标记。

HaloTag技术具有许多令人兴奋的优势。首先，HaloTag标记物的小尺寸使其能够轻松地与目标蛋白质结合，不会对蛋白质的结构和功能产生明显的影响。其次，HaloTag标记物具有极高的亲和力，可以实现高效的蛋白质标记和纯化。此外，HaloTag标记物的化学结构多样性，使得研究人员可以选择适合自己实验需求的标记物，如荧光染料、亲和树脂和质谱标记物等。这为蛋白质功能研究、蛋白质相互作用的鉴定以及蛋白质定位提供了更多的可能性。

除了以上的优势，HaloTag技术还具有操作简便、高灵敏度和广泛适用性等特点。它可以用于多种生物样本，包括细胞系、原代细胞、组织和活体模型等。无论是在基础研究领域还是在药物发现和开发中，HaloTag技术都展现出巨大的潜力。

HaloTag的荧光配体：

CA-SiR Ligand是一款以四甲基硅罗丹明为母体的远红发射荧光配体，基于其在溶液中无色亲酯的内酯结构和标记在HaloTag 蛋白后荧光的两性离子结构之间的高效转换，可以实现对目标蛋白的“免洗”标记。

CA-TMR Ligand和 CA-R110 Ligand是以氧罗丹明为母体的荧光配体，二者皆具有良好的荧光亮度、较高的光稳定性、较低的光毒性和较好的细胞膜渗透能力；目前已广泛应用于宽场、共聚焦、单分子定位示踪和SIM超分辨成像等多种模态的成像系统中，其较好的生物相容性使其可以应用于哺乳动物细胞、植物、细菌、酵母等生物体系的荧光成像。

相较于CA-TMR Ligand 和CA-R110 Ligand荧光配体，CA-SiR Ligand荧光配体不仅具有良好的荧光亮度、较高的光稳定性和较低的光毒性，其极佳的生物相容性和高效的细胞膜渗透能力，使得CA-SiR Ligand荧光配体在哺乳动物细胞、植物、细菌、酵母和活体模式动物等生物体系中有着广泛的应用，并可在除宽场、共聚焦、单分子定位示踪和 SIM 之外的STED超分辨成像体系中进行活细胞荧光成像。

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