Biogradetech：泛素化

关于泛素蛋白修饰

靶蛋白的多聚泛素化是调节蛋白酶体介导降解的成熟机制，这种重要的翻译后修饰(PTM)的失调已被证明可以促进疾病进展。现在人们认识到，多聚和单聚泛素化可以控制关键蛋白质功能，如蛋白质-蛋白质相互作用、空间调节和与其他PTMs的串扰。蛋白质组学研究表明，数千种蛋白质受泛素化调节；然而，研究靶蛋白内源性泛素化的工具并不容易获得。许多研究目标蛋白泛素化是使用Ub和蛋白过表达系统进行的。虽然这些数据显然很重要，并且可以提供关键信息，如位点特异性，但Ub过表达也可以掩盖生理变化。Biogradetech 开发了一系列的产品，用于泛素化的相关研究。

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一、泛素化蛋白快速富集纯化磁珠

基于已知具有泛素亲和力的蛋白结构域，串联泛素已被开发用于分离和鉴定泛素化蛋白。在单个泛素结合相关结构域(UBA)上，泛素蛋白亲和磁珠对多泛素基团的亲和力增加了1000倍。此外，泛素蛋白亲和磁珠对多泛素化蛋白具有保护作用，允许在相对较低的丰度下检测。这些特性有效地“捕获”了处于多泛素化状态的蛋白质。泛素蛋白亲和磁珠可用于从细胞和组织提取物中分离、富集和鉴定泛素化蛋白。

常见用途：

1.从细胞系，组织，器官中Pull down多聚泛素化蛋白

2.多聚泛素化蛋白深度富集纯化与分离（蛋白质组研究）

3.保护多聚泛素化蛋白，免于被去泛素化（DUB，去泛素化酶）

二、泛素化蛋白检测——WB检测

从任何给定的细胞或组织裂解液中分离和富集修饰蛋白。然后使用针对目标蛋白的一抗，通过标准的western blot程序分析富集蛋白群。

a. 研究瞬时调节机制；

b. 测量多个通路成员蛋白的信号通路；

c. 探索一种可能的蛋白修饰；

三、总泛素化蛋白/泛素化靶蛋白的定量方法—ELISA检测

Ubiquitin protein/Ubiquitin target protein ELISA quantitative Assay是一种夹心测定法，可用于细胞裂解液中泛素/泛素靶蛋白的绝对测量。这种基于平板的测定依赖于使用专有的泛素结合试剂捕获总泛素/泛素靶蛋白。

1.使用抗泛素抗体准确定量总泛素(单泛素和多泛素)。

2.浓度结果以?g/mL为单位，而不是任意单位。

四、泛素抗体

五、泛素酶