Biogradetech：脂质探针——BODIPY 581/591 NHS

产品描述：

BODIPY 581/591染料是明亮的红色荧光染料，其激发和发射与罗丹明红和AF 568相似。它具有高消光系数和荧光量子产率，对溶剂极性和pH值变化相对不敏感。与高水溶性荧光基团AF 488染料和荧光素(FITC)不同，BODIPY 染料具有独特的疏水性，适用于染色脂质、膜和其他亲脂性化合物。BODIPY 581/591 染料具有相对较长的激发状态寿命(通常为5纳秒或更长），可用于基于荧光偏振的测定以及多光子激发的大型双光子截面。

BODIPY 581/591 的NHS酯（或琥珀酰亚胺酯）是将该染料与蛋白或抗体偶联的非常常用的工具。NHS酯可用于标记蛋白的伯胺 (R-NH2)、胺修饰的寡核苷酸和其他含胺分子。由此产生的 BODIPY 581/591 偶联物表现出明亮荧光、窄发射带宽和相对较长的激发状态寿命，可用于荧光偏振测定和双光子激发 (TPE) 显微镜检查。

BODIPY 581/591具优秀的特征：

①发射波长在电磁波谱的可见光区域，非氧化态(591nm)和氧化态(510nm)两种形式的光谱能够很好的分开；

②具高量子产量，正因如此，使用低标记浓度即可，确保对膜产生低的干扰，且维持良好的信噪比；

③具有良好的光稳定性，产生很低的荧光伪影；

④基本上对环境变化比如pH或溶剂极性不敏感；

⑤亲脂性，轻松进入膜；

⑥一旦氧化，探针保持亲脂性，且不会自发地离开脂质双分子层；

⑦非氧化态和氧化态定位在脂质双分子层内两个不同的区域，一种位于浅层，一种位于深层；

⑧高达50?M的浓度对大鼠成纤维细胞无毒性；

⑨对各种氧自由基和过氧亚硝酸盐灵敏，但对超氧化物、一氧化氮、过渡铁离子和氢过氧化物不灵敏；

⑩其对氧化的灵敏度与内源性脂肪酰基团相当。

关于Biogradetech的BODIPY?581/591 NHS酯(B-CHM101)的详细信息：

荧光基团标记：BODIPY?581/591染料

反应性基团：NHS酯

反应性：蛋白和配体、胺修饰的寡核苷酸上的伯胺

Ex/Em：581/591nm

消光系数：136,000 cm^-1M^-1

分子量：489.28

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典型偶联反应：

胺反应性试剂可与几乎任何蛋白或肽偶联；提供的方案针对IgG抗体进行了优化。可以与任何量的蛋白发生反应，但为了获得较佳结果，蛋白浓度应至少为2 mg/mL。我们建议使用三种不同摩尔比的反应性试剂对蛋白进行三种不同程度的标记。

BODIPY? NHS酯可溶于高质量的无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲亚砜(DMSO)中，并在 0.1-0.2 M碳酸氢钠缓冲液(pH值 8.3)中于室温下进行反应，持续1小时。由于末端胺的pKa 低于赖氨酸ε-氨基基团的pKa，您可以使用接近中性pH值的缓冲液对胺末端进行更具选择性的标记。

偶联物纯化:

通常使用凝胶过滤柱(如Sephadex? G-25、BioGel? P-30或等同产品)将标记抗体与游离BODIPY?染料分离。对于更大或更小的蛋白，选择具有适当截留分子量的凝胶过滤介质或通过透析纯化。

Biogradetech生命科学和医药研发行业关键原料与试剂的领先供应商：Biogradetech成立于2015年，总部位于美国加利福尼亚州，早期以产品技术研发服务起家，逐步发展了广泛的产品线，并将其商业化销售，包括蛋白质、抗体、酶、培养基、试剂盒和仪器。适用于细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域。