ALPCO：c-肽ELISA

ALPCO C肽ELISA用于定量测定人血清和血浆中的C肽。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品c-肽ELISA。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

c-肽ELISA 检测方案：

ALPCO C肽ELISA是一种夹心型免疫测定法。96孔微孔板上涂有C肽特异性单克隆抗体。将标准品、对照品和样品与测定缓冲液一起添加到微孔板孔中。然后将微孔板在微孔板振荡器上以700-900rpm的速度在室温下孵育。第一次孵育完成后，用洗涤缓冲液洗涤孔并吸干。然后加入共轭物，在微孔板振荡器上以700-900rpm第二次孵育微孔板，洗涤并吸干。加入TMB底物，在室温下在微孔板振荡器上以700-900rpm第三次孵育微孔板。第三次孵育完成后，加入StopSolution，用分光光度计在450nm处测量光密度（OD）。产生的颜色强度与样品中C肽的量成正比。

所需材料：

用于分配高达100微升的精密移液管（带一次性吸头）

用于分配高达100微升的可重复使用或多通道移液管

用于试剂配制的容量瓶和移液管

用于试剂配制的蒸馏水或去离子水

微孔板洗涤器或洗涤瓶

能够以700-900转每分钟的速度工作的微孔板振荡器

带有450纳米滤光片的微孔板阅读器

用于样本准备的涡旋混合器

注意事项：

试剂盒中包含的人血液制品已针对HIV（人类免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）的存在进行了检测。这些病毒的检测方法不能保证病毒的完全不存在；因此，所有试剂应被视为潜在的传染性物质。处理和处置应符合所有适当的国家和地方关于潜在生物危害材料处理的规定。

所有来源于动物的材料均为疯牛病阴性。然而，所有材料应远离反刍动物。

避免与皮肤直接接触。

本产品不可内服。

使用本产品时，避免进食、饮水或吸烟。

不要用口吸任何试剂。

试剂盒中的试剂是特定批次的，不得替换。

不要使用超过有效期的试剂。

不建议对测试程序进行变更，这可能会影响测试结果。

测定程序：

所有试剂和微孔板条在开封前应平衡至室温（18-25°C）。使用前轻轻混合所有试剂。每次测定运行和每次使用多个微孔板时，都必须执行标准曲线。所有标准品、对照品和样本都应双重运行。

1. 在打开铝箔袋前，应先将微孔板平衡至室温。为标准品、对照品和样本的双重测定分配足够的微孔板条。其余的微孔板条应存放在含干燥剂的密封铝箔袋中，置于2-8°C。

2. 将每个标准品、对照品和样本的25微升分别吸入相应的孔中。见试剂准备。

3. 向每个孔中加入50微升的测定缓冲液。

4. 用板封膜覆盖微孔板，在室温下孵育1小时，在微孔板振荡器上以700-900转每分钟的速度摇动。

5. 倒掉孔中的内容物，使用微孔板洗涤器用每次350微升的工作强度洗涤缓冲液洗板6次（见试剂准备）。或者，使用带有洗涤喷嘴的洗涤瓶将工作强度洗涤缓冲液注入孔中。（不建议使用多通道移液管。必须以足够且均衡的力量分配洗涤缓冲液，以便正确洗涤孔。）每次洗涤之间，将微孔板倒置以丢弃液体，并在吸水纸上用力拍打倒置的微孔板。在最后洗涤后（自动或手动），通过倒置并用力拍打微孔板在吸水纸上，去除孔中的任何残留洗涤缓冲液和气泡。

6. 向每个孔中加入100微升的工作强度结合物（见试剂准备）。

7. 用板封膜覆盖微孔板，在室温下孵育1小时，在微孔板振荡器上以700-900转每分钟的速度摇动。

8. 倒掉孔中的内容物，并用350微升的工作强度洗涤缓冲液洗板6次（见步骤5）。

9. 向每个孔中加入100微升的TMB底物。

10. 用板封膜覆盖微孔板，在室温下孵育15分钟，在微孔板振荡器上以700-900转每分钟的速度摇动。

11. 向每个孔中加入100微升的终止溶液，并轻轻摇动微孔板以混合内容物。在进行下一步之前，去除任何气泡。

12. 将微孔板放入能够读取450纳米吸光度的微孔板阅读器中。在加入终止溶液后应立即分析微孔板，且不得超过30分钟。

文献参考：

1. Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。