本试剂盒用于酶免疫测定法定量测定人血清中的瘦素。此套件仅供研究使用。不用于诊断程序。
作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品瘦素ELISA试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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瘦素ELISA试剂盒 | ALP-11-LEPHU-E01 | 查看 |
瘦素ELISA试剂盒测定原理:
以下酶免疫测定的原理遵循典型的两步捕获或“三明治”型测定。该检测利用了两种高度特异性的单克隆抗体:将瘦素特异性的单克隆抗体固定在微孔板上,将瘦素不同表位特异性的双克隆抗体与生物素结合。在第一步中,样品和标准品中存在的瘦素与固定抗体和生物素化抗体结合,从而形成三明治复合物。通过洗涤步骤去除过量和未结合的生物素化抗体。第二步,加入链霉抗生物素蛋白-HRP,它能特异性结合任何结合的生物素化抗体。同样,未结合的链霉抗生物素蛋白-HRP通过洗涤步骤去除。接下来,加入酶底物(TMB),形成与瘦素含量成正比的蓝色产物。通过加入终止溶液使酶反应停止,将蓝色转化为黄色。在450nm处用微量滴定板读数器测量吸光度。使用一组标准来绘制标准曲线,从中可以直接读取样品和对照中的瘦素含量。
程序注意事项和警告:
1. 本试剂盒仅供研究使用,不用于诊断程序。
2. 处理试剂盒试剂时,应遵循以下良好的实验室操作规范:
- 不要用口吸管。
- 在处理样品或试剂盒试剂的区域不要吸烟、饮食。
- 处理样品和试剂盒试剂时穿戴防护服和一次性手套。
- 测试后彻底洗手。
- 避免与眼睛接触;使用安全眼镜。如果发生接触,请立即用水冲洗并联系医生。
3. 用户应充分理解本协议,以成功使用此试剂盒。只有严格遵守和仔细遵循提供的说明,才能获得可靠的性能。
4. 不要使用超过标签上标明的有效期的试剂盒。
5. 如果试剂盒试剂明显损坏,请勿使用试剂盒。
6. 不要在测试中使用不同试剂盒批次的组分,并且不要使用任何超过标签上打印的有效期的组分。
7. 所有试剂盒试剂和样品在使用前应置于室温并轻轻但彻底混合。避免反复冻融试剂和样品。
8. 当指定使用水进行稀释或重组时,使用去离子水或蒸馏水。
9. 使用后,试剂盒的每个单独组分必须立即返回标签上标明的推荐储存温度。
10. 每次运行都必须建立校准曲线。
11. 建议所有客户准备自己的控制材料或血清池,应在每次运行中包括高浓度和低浓度水平,以评估结果的可靠性。
12. 试剂盒中包含的对照品应在每次运行中包含,其结果必须落在质量控制证书中规定的范围内。对照品结果失败可能表明操作技术不当或吸管使用不当、洗涤不完全或试剂储存不当。
13. 分发底物和终止溶液时,不要使用允许这些液体与任何金属部件接触的吸管。
14. 底物溶液(TMB)对光敏感,如果适当储存,应保持无色。如果出现蓝色,则不应使用,这可能表明不稳定性或污染。
15. 不要使用严重溶血、严重脂血、黄疸或储存不当的血清。
16. 含有叠氮化物或硫柳汞的样品或对照品与此试剂盒不兼容。它们可能导致虚假结果。
17. 超出试剂盒测量范围的样品值可能会报告为>100 ng/mL。如果需要进一步稀释和重新测试,只能使用测定缓冲液稀释血清样品。使用任何其他试剂可能导致虚假结果。
18. 避免试剂的微生物污染。
19. 为了防止试剂污染,分配每种试剂、样品、标准品和对照品时使用新的一次性吸管头。
20. 为了防止试剂污染,不要将试剂倒回原容器。
21. 试剂盒试剂必须被视为危险废物,并根据当地和/或国家规定进行处理。
22. 使用试剂盒的消耗品,如果可能含有生物危害(例如吸管头、瓶子或含有人体材料的容器),必须按照生物安全实践处理,以最小化感染风险,并根据当地和/或国家有关生物危害废物的规定进行处理。
23. 试剂盒中的终止溶液组分含有1M硫酸。不要将酸与含有叠氮化钠或次氯酸钠的废物混合。
24. 在操作生物危害或生物污染的溶液时,强烈建议使用安全眼镜和一次性塑料。
25. 需要正确校准与此测试一起使用的设备,例如吸管和吸光度微孔板阅读器。
26. 如果测定程序需要微孔板振荡器,则所需振荡器的类型和速度在“需要但未提供的试剂和设备”部分中说明。使用的振荡器类型和速度都会影响光密度和测试结果。如果使用不同类型的振荡器和/或速度,用户负责验证试剂盒的性能。
27. 不要重复使用微孔板孔。它们仅供一次性使用。
28. 为了避免在潮湿环境中微孔板孔内的凝结,直到微孔板达到室温之前,不要打开包含微孔板的袋子。
29. 当读取微孔板时,微孔中的气泡会影响光密度(OD)。在执行读取步骤之前,仔细移除任何气泡。
典型校准器曲线:
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
作为ALPCO在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。
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