Biogradetech：类器官专用，基质胶（肠道/肺/脑/肿瘤类器官等）

基质胶作为一种重要的细胞外基质，具有广泛的应用价值。它可以用于各种研究领域，如细胞生物学、组织工程、肿瘤研究等。基质胶的特殊成分和结构为细胞提供了理想的生长环境，促进细胞的黏附、迁移和增殖。同时，基质胶还可以模拟人体组织的结构和功能，为研究人员提供了重要的工具。

Biogradetech类器官专用基底膜基质胶是经过精选的，用于器官样结构培养，如果你在使用其他类型的基质胶时遇到无法培养的器官样结构，使用这款基底膜基质系列可以确保实验的有效性和重复性。例如，小鼠肠道类器官、肺类器官、人脑类器官等。

基底膜基质的应用广泛，不仅可以促进细胞的生长和分化，还可以模拟真实的组织环境，为研究细胞行为和疾病机制提供重要工具。无论是进行管状结构形成实验、器官样结构形成实验还是肿瘤器官样结构形成实验，基底膜基质都能发挥重要作用。

如果您对细胞培养和类器官研究感兴趣，那么Biogradetech类器官专用基质胶绝对是你的得力助手。它将为你的实验提供可靠的支持，帮助你揭开细胞行为和组织发育的奥秘。赶快尝试Biogradetech类器官专用基质胶，开启细胞培养的新篇章吧！

作为Biogradetech在中国区域的独家代理，艾美捷科技将为中国客户提供全面的Biogradetech产品以及客户订制化服务。欢迎大家随时联系我们。

产品英文名称：For Organoid Culture, Basement Membrane Matrix

产品中文名称：类器官专用，基质胶（肠道/肺/脑/肿瘤类器官等）

货号：A-MGL55

规格：5mL、10mL

储存条件：≤-20°C

产品描述：

Biogradetech货号A-MGL55类器官专用的基质胶是一种连续的特殊细胞外基质薄膜，形成了内皮细胞、上皮细胞、肌肉细胞或神经细胞与其相邻基质之间的界面。基质胶在发育和伤口愈合过程中会被降解和再生。它不仅支持细胞和细胞层，还对组织结构起着重要作用，影响细胞的粘附、迁移、增殖和分化。基质胶能够成为转移性肿瘤细胞侵袭的主要屏障。

Biogradetech货号A-MGL55类器官专用的基质胶是从Engelbreth-Holm-Swarm（EHS）肿瘤中纯化得到的可溶性基质胶。此基质胶在37°C下形成重组基底膜基质胶。此基质胶的主要成分包括层粘连蛋白、IV型胶原、粘连素和肝素硫酸酯蛋白聚糖。

适用范围：

这是经过精选的被证明用于类器官培养的基底膜基质胶。如果你遇到其它类型的基质胶无法成功培养器官样结构，使用这款基质胶可以保证实验的有效性和可重复性。例如，小鼠肠道类器官、肺类器官、人脑类器官等。  

产品参数：

来源：小鼠肿瘤；

1.颜色：含酚红的基质胶呈黄粉色，无酚红的基质胶呈半透明淡黄色；

2.形态：标准型基质胶在4°C下溶解为透明液体；高浓度基质胶在0°C下溶解后为透明液体，长时间放置于4°C后会半凝胶化。

3.浓度：蛋白质浓度范围为8至26 mg/mL。

4.内毒素：≤ 4.5 EU/mL

5.凝胶时间：室温下5-30分钟凝胶，当温度从22°C升至37°C时，凝胶形成速度加快。

包被涂层方法：

打造成功的细胞培养环境，关键在于选择合适的基质胶。其中，基质胶的包被涂层方法对于不同的应用需求有所不同。下面，我们将介绍基质胶的包被涂层步骤，帮助您轻松应对各种细胞培养挑战。

首先，让我们来了解一下基质胶的解冻过程。将Biogradetech货号A-MGL55高浓度无酚红的基质胶在2-8°C的冰箱中过夜解冻。由于冰箱温度可能有所不同，因此建议在解冻过程中将基质胶放在冰上保持低温，以防止过早凝胶化。解冻后的基质胶在15°C以上的温度下会迅速凝固，因此在使用时要保持冰上状态，以避免不必要的凝胶形成。

Biogradetech货号A-MGL55类器官专用的基质胶有许多应用场景，需要不同的厚度和浓度。例如，用于内皮细胞形成类似毛细血管的结构（管状结构形成实验）、大鼠主动脉组织分化为类似毛细血管的结构（主动脉环形成实验）、上皮类器官形成或肿瘤类器官结构形成，需要较厚的凝胶，也就是厚层凝胶法。而一些应用，如原代细胞的传代培养，需要薄层涂层而不是厚凝胶，因此应采用薄层凝胶法。

厚层凝胶法：

1.按上述方法解冻基质胶；

2.缓慢上下移液将基质胶混匀，注意不要引入空气泡；

3.向细胞培养板表面加入200-300μL/cm²基质胶，平铺均匀，注意避免产生气泡；

4.将培养板放置在 37 ℃，等待 30 min 形成凝胶即可使用。

薄层包被法：

1.按上述方法解冻基质胶；

2.缓慢上下移液将基质胶混匀，注意不要引入空气泡；

3.根据实验需求使用预冷的培养基稀释。建议将基质胶稀释为1:100以用于原代细胞的扩增。对于您的应用，可能需要经验性地确定最佳涂层浓度；

4.加入适量体积的该溶液覆盖整个细胞培养板表面。建议加入300μL/cm²的溶液；

5.将培养板放置在室温，孵育至少1h；

6.吸去上清即可使用。不要让涂层表面干燥。

通过以上步骤，您可以根据不同的细胞培养需求，灵活选择适合的基质胶涂层方法。无论是厚凝胶还是薄层涂层，都能为您的细胞研究提供稳定的3D培养支持，助您取得优异的实验结果。赶快尝试基质胶涂层方法，提升您的细胞培养实验效果吧！  

类器官建立实验操作示例：小鼠肠道类器官

小鼠小肠类器官原代的建立

1. 设备、试剂和耗材

1.1 设备：生物安全柜、移液器、二氧化碳培养箱、倒置显微镜、离心机（低速）；

1.2 试剂：基质胶（货号：A-MGL03 / A-MGL55），小鼠肠道类器官试剂盒，DPBS，抗粘附漂洗液，青霉素-链霉素溶液，DPBS含0.1% BSA, 0.5M EDTA溶液（pH=8.0）；

1.3 耗材：无菌移液器枪头、细胞培养板（例如本方案中的48孔）、细胞培养皿（直径：3.5 cm、6 cm、10 cm）、无菌镊子、无菌组织剪、70 μm滤网、手术刀、无菌EP管和其它耗材（或根据实验设计进行调整）。

2. 实验前准备

2.1 将Biogradetech货号A-MGL55类器官专用的基质胶放入冰盒中，在4°C的冰箱中慢慢解冻过夜；（在操作过程中，不要让产品升温超过4°C。保持产品冷藏，并使用冰冷的溶液或细胞悬液稀释。）

2.2 按照指示准备小鼠肠道类器官完全培养基。

2.3 准备充足的含有0.1% BSA的DPBS。

3. 实验操作步骤

3.1 根据您实验室批准的实验动物伦理和操作规范，处死小鼠。

3.2 准备6cm培养皿，并加入冰冷的含有0.1% BSA的DPBS，备用。（置于冰上）

3.3 在无菌条件下，取出近胃端3~5cm的肠组织，放入“3.2”预冷的DPBS中。

3.4 纵向切开肠腔，轻轻刮去表面绒毛，清洗两次，将小肠组织剪碎至2mm宽，再次清洗两次，转移到含有5mM EDTA的预冷DPBS中，消化20min（置于冰上）。

3.5 消化后，将组织碎片转移到含有DPBS的新培养皿中清洗，并重复两次以去除EDTA。

3.6 用抗粘附漂洗液冲洗5mL移液管。用含有0.1% BSA的DPBS重新悬浮肠碎片，上下移液3~4次，收集悬浮液，用70 μm滤网过滤。再重复一次这个步骤。

3.7 用300 g离心3 min收集隐窝，用1mL含0.1% BSA的DPBS重悬，取20 μL悬液进行镜检和隐窝计数。

3.8 完成计数后，吸取所需数量的隐窝悬液，300 g离心3min。

3.9 弃上清液，将隐窝重悬于基质胶中。基质胶应保持在冰上，以防止其凝固。尽快进行此过程。所使用的基质胶体积取决于沉淀的大小。大约应将70~100个隐窝悬浮在10μL的基质胶中。

注意：不要过度稀释基质胶（基质胶稀释比例应大于70%（基质胶体积/总体积）），否则可能会影响其结构稳定性。

3.10 将含有隐窝的基质胶点在48孔细胞培养板底部，每孔滴12 ~20 μL，位于孔中心。此步骤需尽快完成，因为基质胶可能会在管内或移液枪头中室温凝固。不要让基质胶接触到孔壁。

不同孔板所需的隐窝-基质胶混合物添加量如下表所示：

3.11 将培养板放入37°C二氧化碳培养箱中，孵育15min左右待基质胶凝固。

3.12 在基质胶完全凝固后，向48孔板中每孔加入250μL小鼠小肠类器官的完全培养基。将培养板置于37℃二氧化碳培养箱中培养。可根据经验更换培养基，请密切监测类器官生长状态。

Biogradetech是生命科学和医药研发行业关键原料与试剂的领先供应商。他们提供广泛的产品组合，包括细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域的试剂。Biogradetech的产品受到全球生物研究机构和生物制药公司的高度追捧，他们以高质量、可靠性和服务而闻名。 

Biogradetech成立于2015年，总部位于美国加利福尼亚州，早期以产品技术研发服务起家，逐步发展了广泛的产品线，并将其商业化销售，包括蛋白质、抗体、酶、培养基、试剂盒和仪器。其产品均在严格的全球标准下生产，Biogradetech还提供专业的技术支持，帮助客户选择正确的产品，并正确使用产品。Biogradetech致力于为客户提供高质量的产品和服务，是那些寻求高质量试剂和可靠结果的人值得信赖的合作伙伴。 为了更好地满足亚太地区客户的需求并提升交付速度，Biogradetech在香港设立现货中心，将能更迅速地满足客户的需求，确保订单的高效处理，并加速产品的交付和配送，从而提供更快速、可靠的服务。 

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