Synaptic Systems： m6A 抗体

SYSY是m6A特异性抗体的D一家商业供应商。我们的产品已在700多篇科研发表论文中使用，从而使得研究RNA甲基化的全新方法得以发展。单克隆和重组抗体变体的开发使得非常成功的多克隆抗m6a抗体得到了补充，并保证了Z佳的可重复性和批次间一致性。抗m6A抗体适用于广泛的应用，例如MeRIP、m6A-CLIP和miCLIP测序，经典IP、斑点印迹和ELISA。

m6A 抗体

简介

DNA和RNA水平上的核酸修饰在许多不同的生物过程中起着重要作用。在原核生物中，在DNA 5'-GATC-3'模序上腺苷残基的DAM甲基化使得细胞可在错配修复过程中区分亲本链和子链（A L Lu, D Y Chang, 1988）。在真核生物中，DNA不同的可遗传CpG甲基化模式在基因表达的差异表观遗传调控中发挥重要作用（Meehan et al., 1992）。

RNA分子受多种转录后修饰的影响。在成熟过程中，mRNA分子经历剪接、5′加帽和3′-聚腺苷酸化，这些都是获得具有完备功能的mRNA所必需的（Carter, 1994）。

最近，单核苷酸残基的其他化学修饰已表明会参与蛋白质翻译和RNA加工及其稳定性的微调。其中Z重要的修饰是不同RNA残基在不同位置的甲基化，如m1A、m5C、 m6Am和最后但同样重要的N6 -甲基腺苷，也称为m6A，它是Z丰富且可能也是Z重要的RNA甲基化变体（Zhou et al., 2020）。而像METTL甲基化转移酶复合物这样的m6A writers和像FTO这样的去甲基化erasers （图1），它们可在甲基化转移酶识别位点上微调m6A RNA修饰的可逆状态，即所谓的DRACH模序（Sergeeva et al., 2020）。SYSY抗体从一开始便参与其中。

图1： 转录后RNA甲基化和去甲基化是由writers （METTL复合体）和erasers （如FTO）进行的。而由此产生的位点特异性RNA修饰会进一步影响RNA加工、翻译和稳定性。

探索一切的起点，剪接体

1987年，Peter Bringmann和Reinhard Luehrmann开发了第一个针对m6A的多克隆抗体，用于研究这种RNA修饰在真核剪接体中的相关性。这些抗体使得m6A修饰的小核RNA （snRNAs） U2、U4和U6能够从小核蛋白（snRNPs）中定量免疫分离（Bringmann, Lührmann, 1987）。

1997年，SySy将R. Luehrmann和P. Bringmann的原始m6A抗血清纳入其目录，成为了m6A特异性抗体的第一家商业供应商。

通过MeRIP测序发现m6ARNA甲基化

随后，N6 -甲基腺苷或m6A修饰被证实参与了更多的转录后调控过程，而转录组的m6A甲基化成为一个全新的、快速发展的研究领域。Kate Meyer （Meyer et al., 2012）和Dan Dominissini （Dominissini et al., 2012 and 2013）发表的关键论文为我们亲和纯化的m6A兔多克隆抗体（cat. no. 202 003）在全球的成功铺平了道路。Meyer和Dominissini也开发了基于抗体的m6A测序方法，这是一种基于对携带m6A修饰的免疫分离RNA片段（100 -200 nt长）进行平行测序的方法（图2）。

图 2：MeRIP测序是基于对免疫分离m6A修饰的RNA片段的平行测序。

这种新技术，又名为MeRIP测序，使得科学家能够发现众多转录后调控机制，且所有这些机制都是由m6A修饰调节的，也引起了科学发表论文数量的持续增长（图3）。

 图3：m6A相关的科学发表论文数量随着时间的发展而增长。

结果发现M6A峰富集在3' -UTR区域、停止密码子附近和长外显子内（7、8）。研究表明，m6A修饰可以影响RNA生命周期的每个过程，以及许多生理过程，例如干细胞发育、翻译调节、癌症、脂肪形成等等（Linder et al., 2015）。

先进技术

通过MeRIP测序，m6A残基可以映射到100-200 nt长区域。通过将m6A修饰分配到已识别的DRACH模序上，可以极大缩小m6A残基的确切位置。然而，对于单核苷酸分辨率，必须开发更先进的技术。M6A - clip和miCLIP是基于m6A位点特异性UV诱导的交联抗体，在cDNA合成过程中会诱导可预测的突变和截断模式。这使得m6A残基的映射更加精确（Linder et al., 2015, Ke et al., 2015）。

SYSY抗体可助你在RNA甲基化研究中更胜一筹！

参考文献：

A L Lu, D Y Chang, 1988: Repair of single base-pair transversion mismatches of Escherichia coli in vitro: correction of certain A/G mismatches is independent of dam methylation and host mutHLS gene functions. PMID: 3284785

Bringmann, Lührmann, 1987: Antibodies specific for N6-methyladenosine react with intact snRNPs U2 and U4/U6. PMID: 2951275

Carter, 1994: Spatial localization of pre-mRNA transcription and processing within the nucleus. PMID: 7765739

Dominissini et al., 2012: Topology of the human and mouse m6A RNA methylomes revealed by m6A-seq. PMID: 22575960

Dominissini et al., 2013: Transcriptome-wide mapping of N(6)-methyladenosine by m(6)A-seq based on immunocapturing and massively parallel sequencing. PMID: 23288318

Ke et al., 2015: A majority of m6A residues are in the last exons, allowing the potential for 3' UTR regulation. PMID: 26404942

Linder et al., 2015: Single-nucleotide-resolution mapping of m6A and m6Am throughout the transcriptome. PMID: 26121403

Meehan et al., 1992: Transcriptional repression by methylation of CpG. PMID: 1297654

Meyer et al., 2012: Comprehensive analysis of mRNA methylation reveals enrichment in 3' UTRs and near stop codons. PMID: 22608085

Sergeeva et al., 2020: Modification of Adenosine196 by Mettl3 Methyltransferase in the 5'-External Transcribed Spacer of 47S Pre-rRNA Affects rRNA Maturation. PMID: 32344536

Zhou et al., 2020: Principles of RNA methylation and their implications for biology and medicine. PMID: 32920520

Synaptic Systems（SySy）品牌成立于德国，专注于研发和生产针对突触和神经科学相关抗体，以及用于细胞生物学、组织病理学和高分辨率显微镜的各种抗体，除此之外，还推出与SySy抗体配套使用的试剂盒、试剂等产品组合，全方面满足客户的各种需求。抗体产品线主要有：突触活性区域相关抗体、突触后蛋白相关抗体、RNA修饰如m6A抗体、突触粘附蛋白抗体、SNARE相关抗体、Alzheimer's相关抗体、细胞骨架、离子通道相关抗体等。该品牌产品专业且质量好，在国内外备受好评。作为SySy在中国的区域总代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的SySy产品。