带你了解miRNA酶联免疫分析针对样本中分离的miRNA进行定量和双尾RT-qPCR技术针对总的miRNA和piRNA的定量。MicroRNA(miRNA)是小的非编码RNA分子,可通过沉默靶mRNA从而来调节基因翻译。 它们实际上参与了所有生物过程。大量研究表明,miRNA是许多人类病理学中有潜力的诊断和预后生物标志物。
miRNA酶联免疫分析用于miRNA绝对定量,miREIA检测原理:将生物素标记的特异性DNA寡核苷酸与样本中分离出的miRNA杂交。 然后将DNA / RNA杂交体转移到固相上,固相涂有对完美匹配的RNA / DNA-生物素杂交体的特异单克隆抗体。然后将洗涤后的固相与链霉亲和素-HRP偶联物一起孵育,并通过发色底物?3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)进行显色观察,吸光度与血液样本中存在的特定miRNA种类的浓度成比。
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BioVendor专利产品——双尾RT-qPCR技术
解决传统microRNA PCR检测方法的缺点,双尾RT-qPCR技术具有独特的RT引物机制,与其他方法相比,可提供出色的灵敏度和特异性。双尾RT-qPCR技术已被开发用于总的miRNA和piRNA的定量。
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产品推荐:
一、miREIA试剂盒对从全血,HeLa细胞,外周血单核细胞,结直肠癌组织,关节滑液,唾液和尿液样本中分离的miRNA进行定量
应用 | 名称 | 货号 |
全血样本中miRNA的分离及定量 | RNA分离试剂盒 | RIK001 |
Hela细胞样本中miRNA的分离及定量 | ||
PBMC细胞样本中的miRNA定量 | ||
直肠癌组织样本中miRNA提取及定量 | ||
关节滑液样本中miRNA的分离及定量 | 血浆/血清RNA分离试剂盒 | RIK002 |
唾液样本中miRNA的分离及定量 | ||
尿液样本中miRNA的分离及定量 |
二、总的miRNA和piRNA的定量
双尾RT-qPCR原理:与使用单个结合探针不同,双尾PCR使用两个半探针,它们分别结合到不同的microRNA片段上,这些片段通过折叠的系链连接。虽然每个半探针本身都很短, 无法结合到microRNA上,但当两个半探针互补时,它们会协同结合,这种结合的特异性是非常高的,因为在短半探针中错配的影响非常大。然后可以使用两个特定序列引物对形成的cDNA进行PCR扩增,用SYBR进行检测。
产品货号 | 产品名称 | 品牌 |
RMR001R | miRNA Isolation Kit Cells-Exosomes | BioVendor |
RMR002R | miRNA Isolation Kit Plasma-Serum | BioVendor |
RMR003R | miRNA Isolation Kit FFPE | BioVendor |
RMR004R | miRNA Isolation Kit Tissues | BioVendor |
RDTTRT50 | TT cDNA synthesis system - 50 rxns | BioVendor |
RDTTPCR150 | TT qPCR MasterMix - 150 rxns | BioVendor |
RDTT000****PRI | TT assay primers (RT+qPCR) - 50+150 rxns | BioVendor |
RDM00*** | miREIA complex kit - 96 well format | BioVendor |
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