MethylFlash羟甲基化DNA定量试剂盒（比色法）中含有定量检测全基因组羟甲基化所必需的所有试剂.在检测实验中，DNA被固定在一种有DNA吸附能力的孔上，羟甲基化的片段会被捕获剂以及检测抗体识别，用分光光度计读取微孔板在450nm处的比色度定量.羟甲基化的DNA的量与OD值成线性关系，可以通过本试剂盒提供的方程来计算两种不同的羟甲基化DNA样品的相对羟甲基化状态或者通过标准曲线完全定量5-mc.基于其工作原理和微孔板模式，本试剂盒可以用于各种物种来源的多种样品形式，包括培养的细胞、新鲜和冷冻的组织、石蜡包埋组织、血浆/血清样品以及体液样品.本试剂盒曾经对来自小鼠大脑和海拉细胞系的样品成功地进行了5-hmC的定量，所得到的结果与用HPLC和LC-MS的方法相当.通过使用本试剂盒，研究者们首次在正常人类脑部组织和结肠组织中发现了高丰度的5-hmC.同时，研究结果还显示，正常人类脑部组织和结肠组织中5-hmC分别占总甲基化胞嘧啶（5-mC和5-hmC的总和）的32%和16%.相反，在结肠癌细胞系（HCT116）和宫颈癌细胞系（HeLa）中，5-hmC的比率很低，几乎没有.该羟甲基化DNA定量试剂盒（比色法）内主要产品组份包括：HC1 （10X Wash Buffer）
HC2 （Binding Solution）
HC3 （Negative Control I， 20 ug/ml）
HC4 （Negative Control II， 20 ug/ml）
HC5 （Positive Control， 20 ug/ml）
HC6 （Capture Antibody， 1000 ug/ml
HC7 （Detection Antibody， 400 ug/ml）
HC8 （Enhancer Solution）
HC9 （Developer Solution）
HC10 （Stop Solution）
8-Well Assay Strips （With Frame）
用户指南手册
* Spin the solution down to the bottom prior to use.
Note: The HC3 Negative Control I is an unmethylated polynucleotide containing 20% of cytosine. The HC4 Negative Control II is a methylated polynucleotide containing 20% of 5-methylcytosine. The HC5 Positive Control is a hydroxymethylated polynucleotide containing 20% of hydroxymethylcytosine.
产品特点
1、整个比色法检测实验的操作简单易学，方便快捷，只需要3小时45分钟就能完成实验.96孔板模式让您可以根据自己的需要地选择用手工或者高通量；2、试剂盒中提供通用阳性和阴性对照，能用于定量检测各种来源的DNA样品中的羟甲基化状态，包括哺乳动物、植物、真菌、细菌以及病毒；3、试剂盒中含有定量检测全基因组DNA羟甲基化实验所有用到的试剂，包括阳性和阴性对照.直接测定比色度的方法来进行定量检测取代了已过时的和劣质的方法，无须DNA消化/变性、提取，不用使用套色版，不接触放射性材料；4、本试剂盒用到的新方法和专利试剂使得羟甲基化DNA定量实验结果精确、高度灵敏特异，检测极限为40 pg的羟甲基化DNA，检测范围宽至40 pg 到 20 ng，检测灵敏度是HPLC的十倍（0、008% vs 0、08%），不与DNA上甲基化或者未甲基化胞嘧啶反应，专一检测5-hmC.
