琼脂糖/磁珠偶联的Myc标签抗体,免疫沉淀(IP)好帮手

发布者:艾美捷科技发布时间:2018-06-26

     什么情况下会选择标签抗体用于免疫沉淀呢?

 

      当某些目标蛋白没有对应的特异性抗体(eg.抗体所识别的抗原表位被相互作用蛋白所遮蔽,无法与目的蛋白相互作用或抗体选择不合适,所选抗体不能识别处于天然构象的蛋白)而无法进行免疫沉淀时,可以采用一个表位标记蛋白后,再选择针对此表位的标签抗体来进行免疫沉淀。

 

      随着蛋白质组学的迅猛发展,重组蛋白质的使用在近年来大大增加。重组杂合体含有一个亲和标签如GST、Myc、His等,可用于辅助目标蛋白的纯化,这已经被广泛使用。利用融合蛋白有助于重组蛋白纯化和检测的这个有点被广泛认可。Myc标签相当于人的c-Myc 410-419位肽段(序列为:EQKLISEEDL)。Myc标签可放在C端或N端,因此 Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。Myc标签已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。

 

  Myc标签抗体偶联的琼脂糖/磁珠


    为什么推荐使用Myc标签抗体偶联的琼脂糖/磁珠?


      与使用Protein A/G琼脂糖的传统免疫沉淀(IP)方法相比,Abbkine的琼脂糖/磁珠偶联标签抗体,省去了Protein A/G与抗原-抗体复合物结合的步骤偶联抗体直接和目标蛋白结合后,通过离心或使用磁力架,将目标蛋白从细胞裂解液中分离出来。不仅让实验变得简单快捷,更可以避免非特异性结合,降低背景。表位标记蛋白的免疫沉淀可用于确定蛋白的细胞定位、研究翻译后修饰或检测标记蛋白与其它蛋白之间的相互作用。

 

  •       看到这里,您肯定会问,Protein A/G的缺点是什么?

 

  1.       耗时:使用Protein A/G需要额外的孵育与洗涤操作
  2.       效果差:当抗体种属、亚型和ProteinA/G不匹配时,ProteinA/G和抗体结合能力弱
  3.       背景高:和样本中的其他免疫球蛋白结合,产生非特异性结合,导致高背景

 

      这就是艾美捷科技为您推荐琼脂糖&磁珠偶联的Myc标签抗体的原因:

 

产品名称 货号 应用
Anti-Myc Tag Mouse Monoclonal Antibody (2D5), 琼脂糖 A02060AGB IP
Anti-Myc Tag Mouse Monoclonal Antibody(2D5), 磁珠 A02060MGB IP

 

 

      为什么推荐使用Abbkine Myc标签抗体(2D5)偶联的琼脂糖/磁珠?


     该产品的Myc标签抗体为单克隆抗体,克隆号为(2D5)。其抗原为KLP偶联的c-Myc 410-419位肽段(序列为:EQKLISEEDL),即Myc标签蛋白作为免疫原。该Myc单克隆抗体的效价非常高,WB实验推荐稀释比率为 1:1000-1:10000,甚至有客户报告更高的稀释比率。在免疫荧光IF、免疫沉淀IP实验里的表现也很优异。


      琼脂糖/磁珠偶联Myc标签抗体,优势更加突出:

 

  •       高特异性—高特异性单克隆标签抗体可实现高产量和高纯度免疫沉淀
  •       低背景—稳定、预封闭的填料及特异性抗体减少了免疫沉淀过程中的非特异性结合
  •       规格灵活:100ul, 400ul, 2ml,多规格可供选择。满足不同规模的免疫沉淀需求
  •       操作方便—产品说明书提供了免疫沉淀优化方案,一次免疫沉淀时间约1 - 2小时
  •       兼容性强—填料可以兼容手动及自动化操作

 

      琼脂糖/磁珠偶联Myc标签抗体使用说明:

 

  •       *琼脂糖微球是多孔的,这使得它们具有高的表面积与蛋白质相互接触,并可以容纳大量的液体。在纯化大量蛋白的时候,传统的琼脂糖微球偶联抗体是IP实验的完美选择。(琼脂糖:每个样品加入20ul悬液)
  •       *在IP实验中,由于所有的相互作用均发生在磁珠的外表面,并且磁珠的尺寸更均一,所以磁珠的可重复性和纯度通常高于琼脂糖。磁性分离不需要离心和多次洗涤,且孵育时间短,在日常小规模、快速处理多个样品的IP实验时,磁珠偶联抗体更简单、更快速。(磁珠:每个样品加入10-20ul悬液)
  •       *提供形式:液体(抗体-琼脂糖/磁珠复合物:保护液=1:1,50%的悬浮液)
  •       *储存方式:4°C可保存一年,琼脂糖偶联标签抗体避免冻融和涡旋;磁珠偶联标签抗体避免冻融和离心

 

 

      脂糖/磁珠偶联的Myc标签抗体说明书:


      琼脂糖偶联Myc标签抗体:https://www.abbkine.com/datasheet/A02060AGB.pdf

      磁珠偶联Myc标签抗体: https://www.abbkine.com/datasheet/A02060MGB.pdf

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