超好用的线粒体膜电位荧光探针——Cell Meter 线粒体膜电位（MMP）测定试剂盒

       人体的ATP有95%为线粒体所提供，合成的ATP通过线粒体内膜ADP/ATP载体与细胞质中的ADP交换进入细胞质，参与细胞的各种需能过程，因此线粒体与细胞维持正常功能密切相关。线粒体在呼吸氧化过程中，将所产生的能量以电化学势能储存于线粒体内膜，在内膜两侧造成质子及其他离子浓度的不对称分布而形成线粒体膜电位(Mitochondrial membrane potential，MMP)。正常的MMP是维持线粒体进行氧化磷酸化、产生三磷酸腺苷的先决条件, MMP的稳定有利于维持细胞的正常生理功能。

      近年来研究发现多种细胞在不同因子作用下发生凋亡时均伴有MMP的下降，线粒体氧化磷酸化过程中起偶联作用的MMP在细胞凋亡早期病理变化以前就开始下降，该过程早于DNA片段化，目前线粒体膜电位下降被广泛认为是细胞凋亡过程中最早发生的事件之一。

      常见研究线粒体膜电位的荧光探针有：

      1.JC-1

      JC-1也称CBIC2(3)，是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质(matrix)中，形成聚合物(J-aggregates)，可以产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1为单体(monomer)，可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。JC-1单体可采用488或514nm激光激发，发出绿色荧光波长为529nm左右；JC-1聚合物(J-aggregates)的最大激发波长为585nm，发出红色波长为590nm。

      2.Rhodamine 123

      Rhodamine 123（罗丹明123）是一种可透过细胞膜的阳离子荧光染料，在正常细胞中能够依赖线粒体跨膜电位进入线粒体基质，荧光强度减弱或消失。在细胞凋亡发生时，线粒体膜完整性破坏，线粒体膜通透性转运孔开放，引起线粒体跨膜电位(ΔΨm) 的崩溃，Rh123 重新释放出线粒体，从而发出强黄绿色荧光，通过荧光信号的强弱来检测线粒体膜电位的变化和凋亡的发生，可用于培养的细胞或从组织中提取出的线粒体的膜电位检测。

      3.TMRM

      Tetramethylrhodamine, methyl ester (TMRM)也是一种可透过细胞膜的阳离子荧光染料，单激光激发和单荧光发射峰。可用543nm激光激发，发射橙红色荧光波长在580nm左右。相对其他荧光探针，TMRM具有许多优点如染料在线粒体积累仅源于膜电位变更；相对毒性更小；和细胞器结合率低；适合做线粒体膜电位的定量分析等。

      今天给大家介绍一类超好用的线粒体膜电位检测工具——Cell Meter 线粒体膜电位（MMP）测定试剂盒，这类荧光测定法使用我们专有的阳离子线粒体探针检测线粒体膜电位变化。 在正常细胞中，当线粒体探针在线粒体中积累时，红色荧光强度增加。 然而，在凋亡细胞中，线粒体染料的荧光强度在MMP降低后降低。

      线粒体膜电位的降低与线粒体通透性转换孔的开放一致，导致细胞色素C释放到细胞质中，进而引发细胞凋亡级联中的其他下游事件。 这些试剂盒经过单独优化，可兼容流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪，对细胞凋亡激活剂和抑制剂进行筛选。

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      图1.用Cell Meter 线粒体膜电位测定试剂盒*适合流式细胞仪 橙色荧光*（货号：22804）检测FCCP诱导的线粒体膜电位变化

      图2.使用Cell Meter NIR线粒体膜电位检测试剂盒检*适合微孔板检测 （货号：22803）测FCCP诱导的线粒体膜电位变化

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