研究细胞凋亡,你得“对症下药”

发布者:艾美捷科技发布时间:2019-01-24

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       What’s细胞凋亡?What happened to细胞凋亡?

 

       细胞凋亡是为维持内环境稳定,受生理或病理一些因素的影响,细胞遵循的一种有序的程序性死亡。细胞发生凋亡,首先细胞体积缩小,连接消失,然后细胞质密度增加,线粒体膜电位消失,通透性改变,释放细胞色素C到胞浆,核质浓缩,核膜核仁破碎,DNA降解成为片段,最终形成凋亡小体,被巨噬细胞吞噬。

细胞凋亡

       细胞凋亡是一个动态过程,此间涉及一系列复杂的生化反应,多个基因的表达调控、信号转导,多种酶参与的级联反应和多种信号通路。细胞感受到相应的凋亡信号刺激,胞内一系列控制开关的开启或关闭,多种酶的活化,引发一系列级联反应。不同的外界因素启动凋亡的方式不同,所引起的信号转导也不相同。

 

 

       What’s早期凋亡?What happened to早期凋亡?

 

       特征一:脂膜内侧外翻

 

       在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期, PS由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35-36kD钙依赖性磷脂结合蛋白,与PS有高度亲和力,它通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V是检测细胞早期凋亡的灵敏指标。通常,使用一些荧光探针标记Annexin V,就可以简单直接地检测到PS外翻这一细胞凋亡的重要特征。

 

荧光探针

       检测工具:

 

产品名称 货号
Abbkine Annexin V-AbFluor™ 405 Apoptosis Detection Kit KTA0001
Abbkine Annexin V-AbFluor™ 488 Apoptosis Detection Kit KTA0002
Abbkine Annexin V-AbFluor™ 555 Apoptosis Detection Kit KTA0003
Abbkine Annexin V-AbFluor™ 647 Apoptosis Detection Kit KTA0004

 

       特质:

       Abbkine专利AbFlourTM系列特色荧光染料(蓝色、绿色、红色)标记重组人Annexin V蛋白,与PI搭配,推出不同荧光凋亡检测试剂盒,适用于用流式细胞仪、荧光显微镜等荧光设备的检测。

 

       特征二:线粒体膜电位下降

       正常线粒体膜电位是维持线粒体进行氧化磷酸化、产生ATP的前提,是维持线粒体功能所必需,线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件,JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位的理想荧光探针,线粒体膜电位较高时,JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物(J-aggregates),可以产生红色荧光(Ex/Em = 585/590),线粒体膜电位较低时,JC-1不能聚集在线粒体的基质中,此时JC-1为单体(monomer),可以产生绿色荧光(Ex/Em = 510/527 nm)。

 

       检测工具:

 

产品名称 货号
Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (JC-1) KTA4001

 

       特质:

 

       Abbkine线粒体膜电位分析试剂盒(JC-1),以JC-1 为荧光探针,快速灵敏地检测线粒体膜电位的变化,此试剂盒可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。

线粒体膜电位分析试剂盒

 

 

       What’s晚期凋亡?What happened to晚期凋亡?

 

       细胞凋亡中, 尤其凋亡晚期,染色体DNA会发生断裂,产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧尿苷三磷酸核苷酸(dUTP)和荧光素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,即脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)。正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,很少能够被染色。由此,TUNEL是检测细胞凋亡后期DNA片段化的最常用方法。

 

染色体DNA

 

       检测工具:

 

产品名称 货号
TUNEL Apoptosis Detection Kit (Green Fluorescence) KTA2010
TUNEL Apoptosis Detection Kit (Orange Fluorescence) KTA2011

 

特质:

       Abbkine的TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒提供实验所需的全套试剂组分以及优化的实验方案,适用于荧光酶标仪、荧光显微镜、流式细胞仪等多种仪器,可用于检测贴壁细胞,悬浮细胞,石蜡包埋组织切片,冰冻切片等多种样品类型。

 

       细胞凋亡一旦开始便无法停止,它是一个高度调控的过程

 

       细胞凋亡可通过两种起始途径启动,内始式途径由非受体刺激激活,如DNA损伤、内质网应激、代谢应激,线粒体外膜通透性改变,如细胞色素c释放,外源途径通过死亡受体与配体结合(如FasL,肿瘤坏死因子TNF)开始。

 

       此后,这两种途径都汇合于caspase级联反应,通过激活caspase蛋白酶或降解蛋白质的酶来诱导细胞死亡。抗凋亡配体,如细胞因子,生长因子,通过不同的信号分子如AKT和p90RSK和抗凋亡蛋白,如Bcl-2和Bcl-x促进细胞的存活、增殖和分化。这些细胞因子和生长因子的退出导致细胞死亡。

 

细胞凋亡

 

       检测工具:

 

产品名称 货号 应用
Bax Mouse Monoclonal Antibody (6F11) ABM40273 IF, IHC-p, WB
Bcl-2 Monoclonal Antibody ABM40041 IF, IHC-p, WB
Bad Polyclonal Antibody ABP55880 ELISA, IF, IHC-p, WB
p53 Monoclonal Antibody ABM40052 IF, IHC-p, WB
FAS Polyclonal Antibody ABP51327 ELISA, IF, IHC-p, WB
Caspase-3 Polyclonal Antibody ABP52935 ELISA, IF, IHC-p, WB
Caspase-8 Polyclonal Antibody ABP50858 ELISA, IF, IHC-p, WB
Caspase 9 Monoclonal Antibody ABM40077 IF, IHC-p, IP, WB
NFkB p65 Monoclonal Antibody ABM40111 IF, IHC-p, IP, WB

 

       特质:

       Abbkine精选细胞凋亡系列皇冠抗体,经过多重严格验证,适用于多种细胞应用,满足大多数客户的研究需求,优异的结果如下:

 

       【1】 大鼠肺组织免疫荧光分析,使用Caspase-3多克隆抗体,1:200稀释。

 

多克隆抗体

 

       【2】石蜡包埋人子宫组织的免疫组化分析,使用Bad多克隆抗体,1:200稀释。

 

Bad多克隆抗体

 

       Abbkine服务于全球蛋白组学和细胞学研究领域的科学家,致力于创新和研发各类蛋白组学和细胞学相关的科研试剂,以期成为生命科学研究发展、药物研发等领域的关键推动者。蛋白组学产品涵盖从样本制备(蛋白提取,纯化,偶联),蛋白定量到用于蛋白检测的抗体和试剂盒;细胞学产品包含用于细胞培养的细胞因子,细胞状态检测、染色,细胞器提取,细胞代谢及细胞病理等试剂(盒)。Abbkine依靠产品组合以及独特的市场营销支持为主要的市场策略和产品创新模式,只为助力您的研究事业!

 

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