Annexin V-AbFluor 488细胞凋亡检测试剂盒,更好的绿色荧光

发布者:艾美捷科技发布时间:2018-07-25

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细胞凋亡


        细胞凋亡(apoptosis)是一种基本生物学现象,指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡,在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。在正常活细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)位于细胞膜的内侧,而在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。膜联蛋白V(Annexin V) 是一种分子量为35~36KDa的钙离子依赖型磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。通过AbFluorTM 488标记Annexin V即可简单快速地直接检测出细胞早期凋亡情况(绿色荧光)。


        碘化丙啶(propidine iodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,而早期凋亡细胞的细胞膜是完好的,对PI有拒染性。但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能透过细胞膜而使细胞核染上。


       使用AbFluo™ 488和碘化丙啶(PI)对细胞进行染色可以区分完整细胞,早期凋亡和晚期凋亡或坏死细胞。有关详细信息,请参阅下面的列表。  


产品名称 货号 激发光与发射光
Annexin V-AbFluor™ 488 Apoptosis Detection kit KTA0002 Ex/Em = 491/517 nm


       * PI:Ex/Em = 535/617 nm (DNA)   Abbkine使用卓越的AbFluor™ 染料,针对Annexin V研发了多种偶联产物。AbFluor™染料与其它荧光标记染料相比,如FITC,TRITC,Cy®染料,AlexaFluor®和Dylight®标记染料,具有相同或更好的标记性能和荧光表现(荧光亮度,耐光性),特别适用于体内成像和流式细胞术。


       以Annexin V-AbFluor™ 488 细胞凋亡检测试剂盒为例:  


 Annexin V-AbFluor™ 488 细胞凋亡检测试剂盒
使用喜树碱(camptothecin)诱导Hela细胞凋亡(24h),使用Annexin V- AbFluor™ 488 细胞凋亡检测试剂盒进行染色。图中展示的是晚期凋亡/坏死细胞。(绿色为细胞膜,红色为细胞核)
 

使用喜树碱(camptothecin)诱导Hela细胞凋亡(24h)。 使用Annexin V- AbFluor™ 488 细胞凋亡检测试剂盒进行染色,可以区分早期凋亡细胞 (Annexin V- AbFluor™ 488 阳性), 晚期凋亡或坏死细胞 (Annexin V- AbFluor™ 488 与PI 均为阳性), 和活细胞 (未染色).


 

  •        Annexin V细胞凋亡检测试剂盒常见问题:


  1.        1.Abbkine Annexin V细胞凋亡检测试剂盒可以检测人类以外动物的细胞凋亡吗?

       答:当然。因为试剂盒原理是Annexin V与磷脂酰丝氨酸(PS)亲和,而PS在不同物种之间没有差异。  


  1.        2.胰酶对贴壁细胞的影响?

       答:胰酶对细胞膜有一定的损伤,但用低浓度胰酶消化, 轻柔吹打贴壁细胞 2~ 3 次, 离心机 4℃, 300g, 5min 离心,处理得当的话, 胰酶造成的损伤可以控制在 5%以内, 有对照组的情况下对实验结果不会造成明显影响。  


  1.        3.为什么只能用不含 EDTA 的胰酶消化贴壁细胞?

       答:Annexin V 是 Ca 依赖性蛋白, 所以不能加入 EDTA, 防止 EDTA 螯合了 Ca 离子从而影响 Annexin V, 进而影响结果。

       

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       Abbkine Scientific Co., Ltd.成立于2012年。我们的使命通过为广大科学家提供人类和动物健康研究所需的基础研究工具,以期成为研究探索的关键推动者。我们将通过明确的核心战略和促进诚信、开放、合作、创新和为客户服务的企业文化,为广大生命科学研究者提供买得起的高品质产品,实现我们的使命。  

 

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