血浆/血清RNA提取纯化试剂盒:血浆/血清cf-RNA分离方案

发布者:艾美捷科技发布时间:2019-01-18

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       【前情回顾】:

       【1】如何收集和保存血液样本中cf-DNA和cf-RNA,点击了解

       【2】如何从血液中提取DNA,点击了解

       【3】如何从血清、血浆中提取外泌体,点击了解

       【4】如何提取血液样本外泌体中的RNA,点击了解

       【5】如何分离血浆、血清中的外泌体,并提取外泌体中的RNA,点击了解

       【6】如何从血浆、血清样本中分离出游离DNA(cf-DNA),点击了解

 

血浆/血清cf-RNA分离

 

       血浆/血清游离RNA或外泌体RNA是某些癌症和疾病的潜在生物标志物。外泌体是40 - 150nm的膜泡,由大多数细胞类型分泌。外泌体存在于唾液、血液、尿液、羊水和恶性腹水以及其他生物液体中。外泌体可能在介导感染因子和肿瘤的适应性免疫反应、组织修复、神经连接和病原蛋白的转移方面发挥功能作用。由于外泌体中包裹的RNA分子受到保护而不被RNA酶降解,因此可以从体液(如血浆或血清)中有效地回收。

 

       如何从收集与保存的血浆和血清样本中分离出RNA(cf-RNA)呢?艾美捷科技作为专业的生命科学领域解决方案供应商,为您推荐Norgen Biotek品牌的血浆/血清RNA提取纯化试剂盒。

 

产品名称及描述 货号 规格 上样量 产品说明
Plasma/Serum RNA Purification Mini Kit 55000 50次 50-200 µL 详情
Plasma/Serum RNA Purification Midi Kit 56100 20次 250 µL-1.5 mL 详情
Plasma/Serum RNA Purification Maxi Kit 56200 10次 2-5 mL 详情

 

 

       血浆/血清RNA提取纯化试剂盒的特色与优势:

 

  1.        1.分离所有大小的游离和外泌体RNA,包括microRNA;
  2.        2.多种血浆和血清输入量(50µL-5mL);
  3.        3.没有苯酚提取物;
  4.        4.没有载体RNA;
  5.        5.结合并洗脱所有RNA,无论大小或GC含量如何,无偏差
  6.        6.将游离的RNA和外泌体RNA浓缩至灵活的洗脱体积;
  7.        7.短时间内纯化高质量的RNA。
  8.        8.纯化的血浆/血清RNA可用于很多下游应用,包括PCR,qPCR,甲基化敏感的逆转录qPCR,逆转录PCR,RNA印迹,RNA酶保护和引物延伸,表达阵列测定和NGS。

 

 

       血浆/血清NA纯化小提试剂盒(货号55000),厂家测试结果:

 

       从不同体积的血浆中纯化cf-RNA。该血浆由EDTA收集的血液中制备而来。然后将3ul纯化的RNA用作RT-qPCR反应中的模板,以检测miR-21(图A)和5S rRNA转录物(图B)。miR-21和5S rRNA转录物的相对含量随着样上样量的增加而线性增加。

 

血浆/血清RNA纯化试剂盒

 

       将纯化的cf-RNA洗脱至不同的体积。然后将3ul纯化的RNA用作RT-qPCR反应中的模板,以检测miR-21。随着洗脱体积的增加,miR-21的相对量增加,表明在非常低的洗脱体积中血浆cf-RNA仍然有比较好的有效浓度。

 

血浆/血清RNA纯化试剂盒

 

 

       【血浆/血清RNA纯化小提试剂盒(货号55000-各品牌横向对比】

 

       血浆中miRNA有效性和一致性检测。Norgen试剂盒与竞争对手Q、A、E试剂盒从血浆中分离miRNA。使用miR-21特异的引物进行茎环RT-qPCR。与其他分离方法相比,Norgen的试剂盒是唯一能够显示miR-21转录本高一致性和回收率的产品。使用Norgen试剂盒从200μL血浆中回收miRNA高于使用竞争对手A试剂盒从600μL纯化的RNA中回收的miRNA。

 

血浆/血清RNA纯化试剂盒

 

 

       血浆/血清RNA纯化中提试剂盒(货号56100),厂家测试结果:

 

       从不同体积的血浆中纯化cf-RNA。该血浆由柠檬酸盐作为抗凝剂收集的血液中制备而来。然后将2ul纯化的RNA用作RT-qPCR反应中的模板,以评估5S rRNA转录物的扩增。随着上样量的增加,5S rRNA转录物的平均Ct值线性降低。

 

血浆/血清RNA纯化试剂盒

 

       从不同体积的血浆中纯化cf-RNA。该血浆由柠檬酸盐作为抗凝剂收集的血液中制备而来。然后将2ul纯化的RNA用作RT-qPCR反应中的模板,以评估来自不同血浆体积的5S rRNA转录物(A)和miR-21(B)的线性关系。Norgen的血浆/血清RNA纯化中提试剂盒能够从0.75 mL血浆中回收97%的5S rRNA转录物和miR-21转录物。此外,从1.5mL血浆中回收95%的5S rRNA转录物和miR-21。

 

血浆/血清RNA纯化试剂盒

 

       检测人5S rRNA转录物时在血浆RNA样品中存在的抑制剂含量检测。使用Norgen试剂盒从不同体积血浆中分离cf-RNA。在20μL的逆转录qPCR反应中使用不同的洗脱体积,以观察Ct值的变化。随着PCR上样量的增加,Ct值趋于降低,表明使用Norgen试剂盒从血浆中纯化的cf-RNA不含血浆中的常见抑制剂。

 

血浆/血清RNA纯化试剂盒

 

 

       血浆/血清RNA纯化大提试剂盒(货号56200),厂家测试结果:

 

       从不同体积的血浆中纯化cf-RNA。该血浆由柠檬酸盐作为抗凝剂收集的血液中制备而来。然后将2ul纯化的RNA用作RT-qPCR反应中的模板,以评估来自不同血浆体积的5S rRNA转录物(A)和miR-21(B)的线性关系。Norgen的血浆/血清RNA纯化大提试剂盒能够从3mL血浆中回收92%的5S rRNA转录物和91%的miR-21。此外,从5mL血浆中回收90%的5S rRNA转录物和90%的miR-21。

 

血浆/血清RNA纯化试剂盒

 

       检测人5S rRNA转录物时在血浆RNA样品中存在的抑制剂含量检测。使用Norgen试剂盒从不同体积血浆中分离cf-RNA。在20μL的逆转录qPCR反应中使用不同的洗脱体积,以观察Ct值的变化。随着PCR上样量的增加,Ct值趋于降低,表明使用Norgen试剂盒从血浆中纯化的cf-RNA不含血浆中的常见抑制剂。

 

血浆/血清RNA纯化试剂盒含血浆中的常见抑制剂

 

 

       已发表文章参考:

 

  1.        1.MicroRNA molecular profiling from matched tumor and bio-fluids in bladder cancer.Molecular Cancer. 2015.
  2.        2.Serum microRNA-34a is potential biomarker for inflammation in nonalcoholic fatty liver disease.Asian Biomedicine. 2016.
  3.        3.Circulating MicroRNAs: Association with Lung Function in Asthma.PLOS ONE. 2016.
  4.        4.Circulating nucleic acids damage DNA of healthy cells by integrating into their genomes.Journal of Biosciences. 2015.

 

       Norgen Biotek成立于1998年,公司总部位于加拿大,是一家著名全球化生物技术公司,生产基于专利技术的核酸和蛋白质纯化及富集产品用于研究和诊断。Norgen Biotek 在2003年获得加拿大国家研究委员会颁发的科技创新奖,是一家致力于样品制备并获得ISO 9001(产品质量)、ISO 13485(产品可用于商业化的医疗设备,包括用于体外诊断领域)和ISO 15189(可用于临床检测机分子诊断领域的研发能力)认证的生物科技公司。目前该公司的产品多达700余种,提供一流的样品制备试剂盒,应用于基因组和蛋白组等不同的领域。

 

      艾美捷科技与国内外优秀的生物试剂供应商保持着密切的合作关系,目前已成为众多国际知名品牌的中国总代理或一级代理,主要包括:Abbkine、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Alomone Labs、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、PhytoAB、Norgen Biotek、Mabtech、iRegene、StressMarq、Trevigen、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Mabtech、Solis BioDyne等,可以在第一时间为用户提供最前沿的专业资讯、完备的产品及物流服务。

 

       作为Norgen Biotek在中国的区域总代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供最全面的Norgen Biotek产品以及订制服务。

 

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