【神经营养因子专题】BDNF检测哪家强，Scientific Report告诉您

神经营养因子是一类对神经元的发育、存活和凋亡起重要作用的蛋白质，其成员包括神经生长因子（NGF），脑源性神经营养因子(BDNF)，神经营养因子3(NT-3)，神经营养因子4(NT-4)等，这些蛋白质是治疗神经损伤等疾病的潜在药物标靶。

生物标记物用于支持诊断或检测治疗效果是神经病学和神经精神病领域尚未满足的主要临床需求。尽管已经发表了大量关于脑疾病与生物液体中存在的分子标记物之间关系的研究，但只有少数临床上有用的生物标记物被成功地验证用于常规临床实践。

脑源性神经营养因子（BDNF）是脑疾病中最有前景的生物标志物之一，但目前尚缺乏确切的临床验证。BDNF是一种分泌性的二聚体生长因子，存在于大多数人体组织中，包括大脑和血液。已知BDNF对特定神经元种群发育过程中的存活和分化以及成年期神经元网络的维持和可塑性中起着重要作用。与其他神经营养素类似，BDNF首先被合成为一种32 kDa的前体蛋白，称为的前体BDNF，然后被不同的蛋白酶剪切，产生14 kDa的成熟形式或28 kDa的截短形式。有趣的是，人体内不同形式BDNF的动态改变与认知障碍和精神紊乱有着密切的关系。

脑源性神经营养因子（BDNF）作为一种潜在的生物标志物，越来越受到人们的关注，以支持对脑疾病的诊断或监测治疗效果。循环的BDNF可在血清、血浆或全血中测定。然而，由于样品采集和BDNF分析方法的多样性，导致结果的再现性较差，限制了BDNF作为生物标志物的使用。

为了克服这些局限性，Alessio等人使用40名健康成人的血清，比较了市面上常见的五种ELISA测定试剂盒（Aviscera Bioscience、Biosensis、Millipore ChemiKine（^TM）、Promega Emax（^®）、R&D-System-Quantikine（^®））和一种多重分析（Millipore Milliplex（^®））对人血清中BDNF的检测效果。所有试剂盒均显示100%样品回收率，然而，它们在5%到20%之间表现出非常不同的分析间差异。实际实验结果显示的组间差异高于制造商公布的组间差异，只有Biosensis例外，它具有最佳的总体性能。斑点杂交分析显示，其中两个试剂盒选择性地识别成熟的BDNF，而其他试剂盒同时与前体BDNF和成熟的BDNF反应。具体的实验结果如下：

不同厂家BDNF ELISA试剂盒公布的性能与实际检测的性能的比较

图1. 两次不同时间重复测定，组间差异如图所示，Biosensis的试剂盒变异系数最小（5%）

图2. 三次不同时间重复测定，Biosensis试剂盒变异系数(CV)最小（10%），且各独立测定间差异不显著。

图3

A：检测每个ELISA试剂盒中的抗体对Pro-BDNF和mature-BDNF的特异性（Sigma抗体作为对照）

B：A中Pro-BDNF和mature-BDNF印迹区域的放大

C：Biosensis、Promega Emax®PAB和Sigma的抗体在斑点杂交上的反应性

结果显示：Biosensis、Promega Emax®PAB两个试剂盒选择性地识别mature-BDNF，而其他试剂盒同时与pro-BDNF和mature-BDNF反应。

图4. 各品牌BDNF检测ELISA实际总体性能比较

每个试剂盒在分析内差异、分析间差异、检测范围、灵敏度和处理时间五个方面的性能如图4所示。六个试剂盒中，对于分别检测总BDNF和成熟的BDNF而言， Biosensis和Aviscera-Bioscience表现最为突出，显示五个参数值的最大面积接近的100%（上图）。尤其是Biosensis，即使在第三次重复后（10%）的变异系数最低，三次独立测量之间也没有显著差异。

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Scientific Report专题文章赏析：

A method for reproducible measurements of serum BDNF: comparison of the performance of six commercial assays. Sci Rep. 2015; 5: 17989.

Biosensis是一家由生命科学家和商业团队组成的公司，致力于为全球学术界和工业界的研究人员提供支持。该团队在基础和应用生命科学研究方面拥有超过100年的经验，并在生命科学研究和诊断市场的生命科学抗体，试剂和试剂盒的商业化方面拥有50多年的经验。

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Biosensis的产品系列不仅包括持续增长的神经科学研究抗体系列，还包括200多种定量研究ELISAs试剂盒（1板或2板，自由选择），组织染色（退化神经元染色试剂盒、病理髓鞘染色试剂盒、淀粉样斑块染色试剂等）和细胞可视化试剂（染色）以及针对神经科学和细胞疾病研究的纯化的蛋白质。我们的抗体和试剂已被广泛应用于各种技术，包括蛋白质印迹，免疫组织化学，流式分析，共聚焦显微镜实时成像，生物抑制和细胞培养以及克隆。最后，通过总共340多篇同行评审的研究出版物和精湛的技术支持和经验，Biosensis能够为神经科学及其相关研究领域提供业内无与伦比的客户支持和科学专业知识。

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