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TECHNICAL COLUMN
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血清制备 1.取血后,37oC 下,让血液凝固 1 到 2 小时(不加抗凝剂); 2.4oC 冰箱过夜(让血块固缩); 3.当血清自然析出后, 4oC,3000 转/分,离心 10 分钟,分离血清,弃去
确定抗生素作用的最佳浓度
该操作以 Invitrogen 公司的脂质体转染试剂 LipofectAMINE 为例,其它转染试剂可参照各自的使用说明书进行。
重组子可通过酶切进行鉴定,也可以利用扩增引物通过 PCR 进行鉴定,阳性重组子能切出所需要的片段或得到相应片段的 PCR 产物
取 100ul感受态细胞于冰浴上融化
挑取适当菌株的 E.coli 单菌落接种于 2ml SOB 培养液中,37℃摇床过夜
连接前先电泳确定待连接载体与片段的浓度
酶切前确定待切样品的浓度, 并选择合适的限制性内切酶和配套 Buffer
加入 1/10 体积的乙酸钠(3 mol?L,PH=5.2)于 DNA 溶液中充分混匀,使其最终浓度为 0.3 mol?L
此方法适用于小量质粒DNA 的提取提取的质粒 DNA 可直接用于酶切PCR扩增 。
琼脂糖电泳,将特异电泳带用刀切下放入到 EP 管中,称琼脂糖带的重量;2. 按照每100mg 加 400?l 的量加入binding buffer,放入到 EP管振荡器中,45℃~55℃温育振荡,直到所有的琼脂糖都
1.用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净,放在制胶平板上,封闭模具边缘,架 好梳子;
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